貴州層析介質批量采購供應商
發布時間：2023-01-05 01:57:02
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CHO細胞培養后先經過離心的方式去除細胞及細胞碎片，也可用微濾或者深層過濾的方式去除細胞及細胞碎片。去除細胞和細胞碎片后用rProtein A親和層析介質經親和層析捕獲，把單抗從培養液中快速的捕獲出來，此步驟可以去除大量的HCP，單抗去折疊片段，病毒及HCD和培養基組份物質。
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層析體系需要優化，緩沖體系的pH要在7.5-8.3之間，添加200-500mM氯化鈉減少非特異性吸附，上樣完后要徹底清洗，保證層析填料孔內，顆粒間未結合的蛋白全部洗出后，在開始洗脫，保證上完樣后，清洗在10CV以上。洗脫過程需要摸索咪唑的強度梯度，用連續咪唑梯度來摸索洗脫濃度。
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問:His標簽蛋白鎳柱純化有雜帶怎么辦？1.樣品本身的的屬性，His蛋白容易被體系中的蛋白酶降解時，此時就要在樣品中加入蛋白酶抑制劑。避免在純化過程中His蛋白被降解，呈現出蛋白純化后純度下降。
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疏水作用層析（Hydrophobic Interaction Chromatography，HIC）是根據分子表面疏水性差別來分離蛋白質和多肽等生物大分子的一種較為常用的方法。由于蛋白質空間結構受到不同緩沖液環境的影響，而發生立體結構發生改變。疏水層析填料利用這種結構的改變，在含鹽的水溶液體系中，借助于層析填料與蛋白質分子之間的疏水作用達到吸附活性蛋白分子的目的，這種層析技術稱為疏水作用層析。
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