云南層析介質批發多少錢
發布時間:2023-01-21 01:56:20云南層析介質批發多少錢
Seplife?IEX離子交換層析填料是采用獨有的聚合物合成技術制備出以聚甲基丙烯酸酯為骨架的微球。該聚合物微球經過表面親水性改造以增加親水性,再通過化學合成的方法鍵合不同的離子交換基團。由于其良好的親水性和較好的物理、化學穩定性及剛性結構,使得離子交換層析填料具有良好的生物相溶性及使用壽命,并提高純化效率。
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His-Tag純化時金屬螯合介質的選擇:1、科研微量制備——Ni Seplife HP(IDA),此層析填料分辨率高,科研微量制備可用此填料純化,純度更高。2、樣品中含有DTT或EDTA——Ni Seplife FF(TED),此填料可以耐受100mM的EDTA及10mM的DTT,樣品中含有EDTA及DTT時無需換液直接過鎳柱純化。3、樣品中含有8M尿素(6M鹽酸胍)——Ni Seplife FF(NTA),IDA耐受性差,TED結合力弱,在含有高濃度尿素時結合效率差,所以含有變性劑的樣品首選IMAC的鎳柱。
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在了解完樣品的情況后,結合層析工藝,對樣品做適當的前處理,可以有效降低介質的壽命衰減。樣品中的顆粒物質在層析前要進行澄清處理,澄清處理的越徹底,對層析填料壽命衰減影響越小。樣品的粘度要盡量小,必要時候要加核酸酶處理,降低大片段核酸含量及粘度。
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層析填料被污染或老化:隨著填料的使用,一些雜質的積累會使層析填料的孔徑發生變化(如堵塞,非特異性吸附積累,微生物污染,破碎等),導致其排阻能力發生偏差而影響分離度。此時可對填料進行CIP清洗,若清洗后還不能達到分離要求,就要更換新的填料。
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樣品的認知:在層析過程要對樣品做足夠的認知,包括樣品的濃度,樣品的組成等做一定的了解,如真核細胞分泌表達的樣品,要了解其上游工藝,培養基組成,培養過程等的一些添加劑是否對層析填料的性能及壽命衰減會有影響,及樣品的酸堿度,離子強度,濁度等做足夠的了解,必要的時候要進行再次澄清處理及體系置換。