河北層析填料廠家供應
發布時間:2023-03-19 01:53:49河北層析填料廠家供應
金屬螯合親和層析介質:組氨酸(His)的殘基上帶有一個咪唑基團,可以和Ni2+,Co2+等過渡金屬離子形成配位鍵而選擇性的結合在金屬離子上,這些金屬離子能夠用螯合配體固定在層析介質上,因此帶有組氨酸標簽的蛋白在經過裝配了金屬離子的層析介質時可以選擇性的結合在介質上,而其他的雜質蛋白則不能結合或者僅能微弱結合。結合在介質上的HIS標簽蛋白可以通過提高緩沖液中的咪唑濃度進行競爭性洗脫,從而得到較高純度的HIS標簽蛋白。
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疏水作用層析(Hydrophobic Interaction Chromatography,HIC)是根據分子表面疏水性差別來分離蛋白質和多肽等生物大分子的一種較為常用的方法。由于蛋白質空間結構受到不同緩沖液環境的影響,而發生立體結構發生改變。疏水層析填料利用這種結構的改變,在含鹽的水溶液體系中,借助于層析填料與蛋白質分子之間的疏水作用達到吸附活性蛋白分子的目的,這種層析技術稱為疏水作用層析。
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生物分子與親和層析介質上的配體通過共價鍵、范德華力、疏水力、靜電力等作用發生生物學專一性結合形成復合物,共價鏈接在載體表面的功能團配體上。蛋白質親和層析技術通過目標蛋白質與配體間通過特異性親和力吸附而達到分離純化的目的,具有生物專一性的特點,純化效率高。
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Seplife? Plasmid LX層析介質是藍曉科技自主研發的一種新型高度交聯的親硫芳香族瓊脂糖層析介質,用于純化超螺旋DNA,廣泛應用于基因治療和DNA疫苗的開發應用。該層析介質具有高流速、低反壓、非特異性吸附低、良好的親水性、化學穩定性和機械性特點,方便進行規模放大,可縮短生產時間,提高生產效率。
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層析填料被污染或老化:隨著填料的使用,一些雜質的積累會使層析填料的孔徑發生變化(如堵塞,非特異性吸附積累,微生物污染,破碎等),導致其排阻能力發生偏差而影響分離度。此時可對填料進行CIP清洗,若清洗后還不能達到分離要求,就要更換新的填料。
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開始純化蛋白前應先制備初始樣品。真正進行蛋白純化的操作之前,首要考慮是目的蛋白的來源。樣品來源可為原始樣品,例如肝臟,肌肉或腦組織。當前,更為常見的是從重組來源的樣品純化蛋白質。一些重要決定需要提前考慮以便優化后續的純化。研究者需要考慮蛋白質的最終用途(例如治療性生物藥,酶測定,結構研究,抗體生成),因為這將決定最終蛋白質制備所需的量和純度。盡管蛋白質表達的詳細討論超出本文范圍,但是在這一點上仍有幾個值得考慮的基本點,因為它們直接影響后續的蛋白純化。