山東蛋白純化市場報價
發(fā)布時間：2023-04-29 01:49:49
山東蛋白純化市場報價
Glutathione Seplife 4FF層析介質(zhì)是藍曉科技自主研發(fā)的一種新型親和層析介質(zhì)，是將谷胱甘肽配基偶聯(lián)到4%高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質(zhì)上，這種偶聯(lián)方式使得介質(zhì)對GST-tagged蛋白和其他谷胱甘肽結(jié)合蛋白有更強的結(jié)合能力。該層析介質(zhì)具有結(jié)合載量高、流速快、反壓小的特點，方便進行工業(yè)化大規(guī)模純化，可有效提高生產(chǎn)效率。
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組氨酸（His）的殘基上帶有一個咪唑基團，可以和Ni2+,Co2+等過渡金屬離子形成配位鍵而選擇性的結(jié)合在金屬離子上，這些金屬離子能夠用螯合配體固定在層析介質(zhì)上，因此帶有組氨酸標(biāo)簽的蛋白在經(jīng)過裝配了金屬離子的層析介質(zhì)時可以選擇性的結(jié)合在介質(zhì)上，而其他的雜質(zhì)蛋白則不能結(jié)合或者僅能微弱結(jié)合。結(jié)合在介質(zhì)上的HIS標(biāo)簽蛋白可以通過提高緩沖液中的咪唑濃度進行競爭性洗脫，從而得到較高純度的HIS標(biāo)簽蛋白。
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1987年Hochulietal.發(fā)現(xiàn)帶有相連組氨酸的多肽和Ni2+-NTA介質(zhì)作用力更強于普通的肽，1988年他第1次用這樣的方法純化了帶六個組氨酸標(biāo)簽的多肽，無論是在天然還是變性條件下一次親和純化都得到很好效果，此后表達帶六個組氨酸標(biāo)簽的蛋白配合IMAC變得非常普遍，相對而言，不帶標(biāo)簽的蛋白純化就非常困難，所以表達帶六個組氨酸標(biāo)簽的蛋白配合IMAC純化變成最常用而且最有效的研究蛋白結(jié)構(gòu)和功能的有力手段。
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表達體系對蛋白純化的影響：開始純化蛋白前應(yīng)先制備初始樣品。真正進行蛋白純化的操作之前，首要考慮是目的蛋白的來源。樣品來源可為原始樣品，例如肝臟，肌肉或腦組織。當(dāng)前，更為常見的是從重組來源的樣品純化蛋白質(zhì)。
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親和層析捕獲后，進一步用強陽離子交換層析SP Seplife Large Scale層析介質(zhì)繼續(xù)純化捕獲的單抗，進一步去除少量的HCP,HCD及第1步親和層析捕獲時rProtein A親和介質(zhì)脫離的親和配基rProtein A。強陽離子交換層析后，通過調(diào)pH的方式用pH3.7-3.8的環(huán)境進行病毒滅活。低pH病毒滅活后，在通過陰離子交換層析Q Seplife Large Scale流穿模式，讓單抗流穿，層析介質(zhì)吸附痕量的雜質(zhì)進一步純化。