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發布時間:2023-04-30 01:49:43黑龍江蛋白純化聯系電話地址
反壓大,流速慢:凝膠過濾層析柱的裝填應控制在60-100cm,太低影響分離度,太高反壓增大。另外層析填料的清潔程度及樣品的粘度,pH,離子強度也會影響液流速度。Protein A是金黃色葡萄球菌表面的蛋白,分子量42kDa,有5個不同的結構域可以結合IgG的Fc片段,具有很強的特異性親和力,每個Protein A分子至少可以結合兩個IgG分子。隨著技術的發展,重組Protein A在不斷的改進,目前用于單抗捕獲的rProtein A多點和瓊脂糖微球等層析填料基質偶聯,減少了使用過程中配基脫落,同時為滿足生物制藥工藝消毒的要求,可以耐受0.1-0.5M氫氧化鈉的處理。
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在層析過程要對樣品做足夠的認知,包括樣品的濃度,樣品的組成等做一定的了解,如真核細胞分泌表達的樣品,要了解其上游工藝,培養基組成,培養過程等的一些添加劑是否對填料的性能及壽命衰減會有影響,及樣品的酸堿度,離子強度,濁度等做足夠的了解,必要的時候要進行再次澄清處理及體系置換。
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我國動物疫苗行業特點:1、產品同質化嚴重,企業產能利用率低。2、落后產能淘汰(產品沒有創新)。3、成本高昂,細胞培養微載體,層析介質,膜組件等生產中耗材依賴進口。4、產品較單一,產品科技含量較低。降本增效成為我國動物行業發展的重心!
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CHO細胞培養后先經過離心的方式去除細胞及細胞碎片,也可用微濾或者深層過濾的方式去除細胞及細胞碎片。去除細胞和細胞碎片后用rProtein A親和層析介質經親和層析捕獲,把單抗從培養液中快速的捕獲出來,此步驟可以去除大量的HCP,單抗去折疊片段,病毒及HCD和培養基組份物質。