貴州蛋白純化廠家供應
發布時間:2023-05-14 01:49:05貴州蛋白純化廠家供應
Plasmid Seplife LX,絲氨酸蛋白酶純化親和層析介質:苯甲脒類物質是絲氨酸蛋白酶的廣譜抑制劑,將這類物質偶聯到高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質上,可以從各種來源的樣品中進一步胰蛋白酶,凝血酶,尿激酶,激肽釋放酶,前激肽釋放酶等絲氨酸蛋白酶。
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洗脫峰雜質多,可能原因:非特異性結合,清洗不徹底,降解等。解決方法:蛋白純化過程加蛋白抑制劑防止降解,上樣完后要徹底清洗,加一定的NaCl和咪唑減少非特異性結合。使用幾次后,介質結合效率降低,柱效降低。可能原因:介質上沉積大量雜質等。解決方法:徹底清洗,IDA/IMAC脫鎳再生處理。
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疏水作用層析(Hydrophobic Interaction Chromatography,HIC)是根據分子表面疏水性差別來分離蛋白質和多肽等生物大分子的一種較為常用的方法。由于蛋白質空間結構受到不同緩沖液環境的影響,而發生立體結構發生改變。疏水層析填料利用這種結構的改變,在含鹽的水溶液體系中,借助于層析填料與蛋白質分子之間的疏水作用達到吸附活性蛋白分子的目的,這種層析技術稱為疏水作用層析。
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樣品的認知:在層析過程要對樣品做足夠的認知,包括樣品的濃度,樣品的組成等做一定的了解,如真核細胞分泌表達的樣品,要了解其上游工藝,培養基組成,培養過程等的一些添加劑是否對層析填料的性能及壽命衰減會有影響,及樣品的酸堿度,離子強度,濁度等做足夠的了解,必要的時候要進行再次澄清處理及體系置換。
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