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山東層析填料生產廠家

發布時間:2023-05-19 01:48:50
山東層析填料生產廠家

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Glutathione Seplife 4FF層析介質是藍曉科技自主研發的一種新型親和層析介質,是將谷胱甘肽配基偶聯到4%高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質上,這種偶聯方式使得介質對GST-tagged蛋白和其他谷胱甘肽結合蛋白有更強的結合能力。該層析介質具有結合載量高、流速快、反壓小的特點,方便進行工業化大規模純化,可有效提高生產效率。

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Ni Seplife FF(TED)——耐受性好,可以耐受100mM EDTA,非常適合真核外泌蛋白的純化。可直接使用NaOH在位清洗,無需脫鎳掛鎳,省時省力。含有8M尿素及6M鹽酸胍的樣品用此鎳層析填料影響結合,低豐度的樣品結合效率效率差。

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在蛋白純化開始之前要對其進行穩定性研究,溫度,pH,離子強度,添加劑及濃度的穩定性研究一定要在純化蛋白之前就進行有效可靠的驗證。對溫度敏感型蛋白的純化制備盡可能在4度的環境中進行。同時對耐高溫的蛋白如糖化酶,可以利用此特性來在高溫下讓其它雜蛋白變性沉淀,目標蛋白活性無影響這一特性來純化蛋白。蛋白存在體系避免劇烈變化,在包涵體復性的過程有深刻體系,梯度逐漸減少變性劑可提高復性率。所以我們在純化蛋白時就要避免體系的劇烈變化。親和層析純化蛋白時,大多需要較低的pH洗脫,在收集洗脫峰的容器中墊緩沖液(常用1M的Tris),讓洗脫下來的蛋白迅速恢復到中性環境。避免純化過程中蛋白發生沉淀。

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Seplife? Plasmid LX層析介質是藍曉科技自主研發的一種新型高度交聯的親硫芳香族瓊脂糖層析介質,用于純化超螺旋DNA,廣泛應用于基因治療和DNA疫苗的開發應用。該層析介質具有高流速、低反壓、非特異性吸附低、良好的親水性、化學穩定性和機械性特點,方便進行規模放大,可縮短生產時間,提高生產效率。

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1、樣品中含有8M尿素(6M鹽酸胍)——Ni Seplife FF(NTA),IDA耐受性差,TED結合力弱,在含有高濃度尿素時結合效率差,所以含有變性劑的樣品首選IMAC的鎳柱。2、含有Cys/Try殘基蛋白——含有Cys/Try 殘基的蛋白和鎳層析填料的結合力弱,此時可以選擇IMAC Seplife FF(IAD)的填料螯合Cu離子進行親和純化(如烏司他丁可用此填料純化)

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蛋白質純化工藝中的其他因素也會對蛋白質的穩定性產生影響。對蛋白質的處理步驟越少越好,在最短時間內采用最少步驟的純化工藝才能保證得到最高產率的活性蛋白質。而且,在整個純化過程中,蛋白質最好都保持在低溫狀態。一般純化過程都在4°C進行,因為這個溫度既可以降低酶解速度(在含有蛋白酶的情況下),又可以保證蛋白質的結構完整性。

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