西藏蛋白純化聯系電話地址
發布時間:2023-05-19 01:48:50西藏蛋白純化聯系電話地址
GST標簽蛋白純化親和層析介質:谷胱甘肽配基是通過12個原子連接臂偶聯到4%的高流速瓊脂糖層析介質上,這種偶聯使得介質對GST-tag融合蛋白和其他谷胱甘肽結合蛋白有更強的結合能力,介質的高蛋白載量和良好的流速性能使大規模生產簡單直接。
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隨著生物制藥工業的發展,各個廠家對下游工藝純化生產效率的要求逐漸提高。在實際生產過程中,具有高耐受壓力,高流速的分離介質更具有優勢。因此,近年來剛性結構的層析填料在生物醫藥領域的應用越來越多,在某些產品的純化中更優于傳統的瓊脂糖葡聚糖類介質。Seplife HM系列層析填料通過在特有的剛性骨架基礎上,對表面進行親水改造,基團鍵合等技術,使填料具有親水性好,載量高,使用壽命長,流速高等特點,與傳統層析填料相比,可大大提高下游純化工藝的生產效率,降低成本,創造出較好的經濟效益。
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層析體系需要優化,緩沖體系的pH要在7.5-8.3之間,添加200-500mM氯化鈉減少非特異性吸附,上樣完后要徹底清洗,保證層析填料孔內,顆粒間未結合的蛋白全部洗出后,在開始洗脫,保證上完樣后,清洗在10CV以上。洗脫過程需要摸索咪唑的強度梯度,用連續咪唑梯度來摸索洗脫濃度。
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1、樣品中含有8M尿素(6M鹽酸胍)——Ni Seplife FF(NTA),IDA耐受性差,TED結合力弱,在含有高濃度尿素時結合效率差,所以含有變性劑的樣品首選IMAC的鎳柱。2、含有Cys/Try殘基蛋白——含有Cys/Try 殘基的蛋白和鎳層析填料的結合力弱,此時可以選擇IMAC Seplife FF(IAD)的填料螯合Cu離子進行親和純化(如烏司他丁可用此填料純化)