陜西層析填料產(chǎn)地貨源公司
發(fā)布時(shí)間：2023-06-06 01:48:18
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紅色染料親和層析介質(zhì)：紅色染料親和介質(zhì)是將活性紅120共價(jià)結(jié)合到高流速瓊脂糖凝膠微球上的一種親和層析介質(zhì)，活性紅120是一個(gè)多環(huán)染料，與自然產(chǎn)生的NADP+具有某些結(jié)構(gòu)的相似性，可以強(qiáng)烈并且特異性結(jié)合寬范圍的蛋白質(zhì)，如乳酸脫氫酶。能與紅色染料特異性結(jié)合的蛋白是由于它們需要核苷酸輔助因子。其他一些蛋白，例如白蛋白，脂蛋白，凝血因子和干擾素，是以非特異性方式與紅色染料相結(jié)合的，如芳香環(huán)陰離子配基的靜電力相互作用或者疏水鍵的相互作用。
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GST標(biāo)簽蛋白純化親和層析介質(zhì)：谷胱甘肽配基是通過12個(gè)原子連接臂偶聯(lián)到4%的高流速瓊脂糖層析介質(zhì)上，這種偶聯(lián)使得介質(zhì)對(duì)GST-tag融合蛋白和其他谷胱甘肽結(jié)合蛋白有更強(qiáng)的結(jié)合能力，介質(zhì)的高蛋白載量和良好的流速性能使大規(guī)模生產(chǎn)簡(jiǎn)單直接。
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His-Tag純化時(shí)金屬螯合介質(zhì)的選擇：1、科研微量制備——Ni Seplife HP（IDA)，此層析填料分辨率高，科研微量制備可用此填料純化，純度更高。2、樣品中含有DTT或EDTA——Ni Seplife FF(TED),此填料可以耐受100mM的EDTA及10mM的DTT,樣品中含有EDTA及DTT時(shí)無需換液直接過鎳柱純化。3、樣品中含有8M尿素（6M鹽酸胍）——Ni Seplife FF(NTA),IDA耐受性差，TED結(jié)合力弱，在含有高濃度尿素時(shí)結(jié)合效率差，所以含有變性劑的樣品首選IMAC的鎳柱。
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His-Tag融合蛋白是目前最常見的蛋白表達(dá)方式，而且很成熟，它的優(yōu)點(diǎn)是表達(dá)方便且不影響蛋白的活性，無論是可溶性表達(dá)或者包涵體都可以用固定金屬離子親和層析（IMAC）純化。IMAC是Porathetal.1975年用固定IDA作為配基的介質(zhì)螯合過渡金屬銅、鎳、鈷或鋅離子，可以吸附純化表面帶組氨酸、色氨酸或半胱氨酸殘基的蛋白。
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CHO細(xì)胞培養(yǎng)后先經(jīng)過離心的方式去除細(xì)胞及細(xì)胞碎片，也可用微濾或者深層過濾的方式去除細(xì)胞及細(xì)胞碎片。去除細(xì)胞和細(xì)胞碎片后用rProtein A親和層析介質(zhì)經(jīng)親和層析捕獲，把單抗從培養(yǎng)液中快速的捕獲出來，此步驟可以去除大量的HCP，單抗去折疊片段，病毒及HCD和培養(yǎng)基組份物質(zhì)。
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藍(lán)色染料親和層析介質(zhì)：藍(lán)色染料親和介質(zhì)是將藍(lán)色染料汽巴蘭偶聯(lián)到高流速瓊脂糖微球上的一種親和層析介質(zhì)，該產(chǎn)品有很高的化學(xué)穩(wěn)定性。其與目標(biāo)蛋白的結(jié)合主要是配基提供的電子對(duì)與疏水作用的綜合結(jié)果，可適用于白蛋白，干擾素，凝血因子以及各種需要NAD+和NADP+的酶的分離純化。