江蘇層析填料批量采購供應商
發布時間:2023-07-04 01:47:00江蘇層析填料批量采購供應商
隨著生物制藥工業的發展,各個廠家對下游工藝純化生產效率的要求逐漸提高。在實際生產過程中,具有高耐受壓力,高流速的分離介質更具有優勢。因此,近年來剛性結構的層析填料在生物醫藥領域的應用越來越多,在某些產品的純化中更優于傳統的瓊脂糖葡聚糖類介質。Seplife HM系列層析填料通過在特有的剛性骨架基礎上,對表面進行親水改造,基團鍵合等技術,使填料具有親水性好,載量高,使用壽命長,流速高等特點,與傳統層析填料相比,可大大提高下游純化工藝的生產效率,降低成本,創造出較好的經濟效益。
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His-Tag純化時金屬螯合介質的選擇:1、科研微量制備——Ni Seplife HP(IDA),此層析填料分辨率高,科研微量制備可用此填料純化,純度更高。2、樣品中含有DTT或EDTA——Ni Seplife FF(TED),此填料可以耐受100mM的EDTA及10mM的DTT,樣品中含有EDTA及DTT時無需換液直接過鎳柱純化。3、樣品中含有8M尿素(6M鹽酸胍)——Ni Seplife FF(NTA),IDA耐受性差,TED結合力弱,在含有高濃度尿素時結合效率差,所以含有變性劑的樣品首選IMAC的鎳柱。
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金屬螯合親和層析介質:組氨酸(His)的殘基上帶有一個咪唑基團,可以和Ni2+,Co2+等過渡金屬離子形成配位鍵而選擇性的結合在金屬離子上,這些金屬離子能夠用螯合配體固定在層析介質上,因此帶有組氨酸標簽的蛋白在經過裝配了金屬離子的層析介質時可以選擇性的結合在介質上,而其他的雜質蛋白則不能結合或者僅能微弱結合。結合在介質上的HIS標簽蛋白可以通過提高緩沖液中的咪唑濃度進行競爭性洗脫,從而得到較高純度的HIS標簽蛋白。
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在生物制藥、結構研究、體外生物化學分析等很多應用中都需要進行蛋白質等生物分子純化。蛋白質可以從組織中獲取,亦或更經常的是從模式生物中過量表達獲得,如細菌、酵母或哺乳動物細胞培養等。蛋白質純化主要是根據它們理化性質的差異來從原料種進行分離純化,其目的就是獲得最多且高純度的功能蛋白質。一個好的蛋白質的純化過程必須要將其純化工藝步驟優化至最少。