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四川層析填料批發(fā)價格

發(fā)布時間:2023-07-16 01:46:33
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我國動物疫苗行業(yè)特點:1、產品同質化嚴重,企業(yè)產能利用率低。2、落后產能淘汰(產品沒有創(chuàng)新)。3、成本高昂,細胞培養(yǎng)微載體,層析介質,膜組件等生產中耗材依賴進口。4、產品較單一,產品科技含量較低。降本增效成為我國動物行業(yè)發(fā)展的重心!

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金屬螯合親和層析介質:組氨酸(His)的殘基上帶有一個咪唑基團,可以和Ni2+,Co2+等過渡金屬離子形成配位鍵而選擇性的結合在金屬離子上,這些金屬離子能夠用螯合配體固定在層析介質上,因此帶有組氨酸標簽的蛋白在經過裝配了金屬離子的層析介質時可以選擇性的結合在介質上,而其他的雜質蛋白則不能結合或者僅能微弱結合。結合在介質上的HIS標簽蛋白可以通過提高緩沖液中的咪唑濃度進行競爭性洗脫,從而得到較高純度的HIS標簽蛋白。

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組氨酸(His)的殘基上帶有一個咪唑基團,可以和Ni2+,Co2+等過渡金屬離子形成配位鍵而選擇性的結合在金屬離子上,這些金屬離子能夠用螯合配體固定在層析介質上,因此帶有組氨酸標簽的蛋白在經過裝配了金屬離子的層析介質時可以選擇性的結合在介質上,而其他的雜質蛋白則不能結合或者僅能微弱結合。結合在介質上的HIS標簽蛋白可以通過提高緩沖液中的咪唑濃度進行競爭性洗脫,從而得到較高純度的HIS標簽蛋白。

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His-Tag融合蛋白純化常見問題:1.His標簽蛋白不和介質結合。a可能原因:超聲功率不合適(太大,蛋白碳化,太小,蛋白沒完全釋放)。解決方法:改變超聲功率或者其它方法破碎細胞。b.樣品或緩沖液不合適。解決方法:確保緩沖液中螯合劑,還原劑,咪唑濃度不是很高。c.His標簽暴露不完全。解決方法:在緩沖液中加變性劑(4-8M尿素,4-6M鹽酸胍),然后用IMAC介質純化。d.His標簽丟失。

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His-Tag融合蛋白是目前最常見的蛋白表達方式,而且很成熟,它的優(yōu)點是表達方便且不影響蛋白的活性,無論是可溶性表達或者包涵體都可以用固定金屬離子親和層析(IMAC)純化。IMAC是Porathetal.1975年用固定IDA作為配基的介質螯合過渡金屬銅、鎳、鈷或鋅離子,可以吸附純化表面帶組氨酸、色氨酸或半胱氨酸殘基的蛋白。

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