四川層析填料商品批發(fā)價(jià)格
發(fā)布時(shí)間：2023-07-18 01:46:47
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層析填料被污染或老化：隨著填料的使用，一些雜質(zhì)的積累會(huì)使層析填料的孔徑發(fā)生變化（如堵塞，非特異性吸附積累，微生物污染，破碎等），導(dǎo)致其排阻能力發(fā)生偏差而影響分離度。此時(shí)可對(duì)填料進(jìn)行CIP清洗，若清洗后還不能達(dá)到分離要求，就要更換新的填料。
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1、樣品中含有8M尿素（6M鹽酸胍）——Ni Seplife FF(NTA),IDA耐受性差，TED結(jié)合力弱，在含有高濃度尿素時(shí)結(jié)合效率差，所以含有變性劑的樣品首選IMAC的鎳柱。2、含有Cys/Try殘基蛋白——含有Cys/Try 殘基的蛋白和鎳層析填料的結(jié)合力弱，此時(shí)可以選擇IMAC Seplife FF(IAD)的填料螯合Cu離子進(jìn)行親和純化（如烏司他丁可用此填料純化）
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生物分子與親和層析介質(zhì)上的配體通過共價(jià)鍵、范德華力、疏水力、靜電力等作用發(fā)生生物學(xué)專一性結(jié)合形成復(fù)合物，共價(jià)鏈接在載體表面的功能團(tuán)配體上。蛋白質(zhì)親和層析技術(shù)通過目標(biāo)蛋白質(zhì)與配體間通過特異性親和力吸附而達(dá)到分離純化的目的，具有生物專一性的特點(diǎn)，純化效率高。親和層析是一種根據(jù)生物分子之間的特異相互作用來分離蛋白的層析方法，如酶和底物、受體和配體、抗體和抗原。這種作用是特異性的也是可逆的，通過這種可逆的結(jié)合和分離來達(dá)到蛋白純化的目的。
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洗脫峰雜質(zhì)多，可能原因：非特異性結(jié)合，清洗不徹底，降解等。解決方法：蛋白純化過程加蛋白抑制劑防止降解，上樣完后要徹底清洗，加一定的NaCl和咪唑減少非特異性結(jié)合。使用幾次后，介質(zhì)結(jié)合效率降低，柱效降低。可能原因：介質(zhì)上沉積大量雜質(zhì)等。解決方法：徹底清洗，IDA/IMAC脫鎳再生處理。
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Seplife?RP反相層析填料是以聚二乙烯基苯或聚丙烯酸酯為骨架以酯基、丁基、苯基、辛烷基或十八烷基為功能基的構(gòu)成的聚合物填料。Seplife?RP反相層析填料由不同長(zhǎng)度和極性的碳鏈提供與目標(biāo)物之間的范德華力作為分離作用力，同時(shí)，較窄的孔徑分步屏蔽了分子大小的影響。使填料在分離過程中專一性更佳。在目標(biāo)物的分子量不大于2000Da的條件下，可以在單純范德華力作用力下完成目標(biāo)物與雜質(zhì)的分離。
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Ni Seplife FF(TED)——耐受性好，可以耐受100mM EDTA，非常適合真核外泌蛋白的純化?？芍苯邮褂肗aOH在位清洗，無需脫鎳掛鎳，省時(shí)省力。含有8M尿素及6M鹽酸胍的樣品用此鎳層析填料影響結(jié)合，低豐度的樣品結(jié)合效率效率差。