江西層析介質批量采購供應商
發布時間:2022-06-16 01:58:39江西層析介質批量采購供應商
抗體純化親和層析介質:重組蛋白A可特異性與抗體的Fc區結合,用于單抗或多抗的分離純化,經過一步層析,就可從腹水,血清或培養液等樣品中得到高純度的抗體。重組蛋白G可用于分離純化細胞培養液或細胞提取物中不同屬抗體或抗體的Fc片段,多位點活化偶聯減少了配體的泄露,用于IgG單克隆抗體的實驗室規模和工業化大規模純化,能迅速處理大體積樣品。
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層析填料被污染或老化:隨著填料的使用,一些雜質的積累會使層析填料的孔徑發生變化(如堵塞,非特異性吸附積累,微生物污染,破碎等),導致其排阻能力發生偏差而影響分離度。此時可對填料進行CIP清洗,若清洗后還不能達到分離要求,就要更換新的填料。
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蛋白質純化工藝中的其他因素也會對蛋白質的穩定性產生影響。對蛋白質的處理步驟越少越好,在最短時間內采用最少步驟的純化工藝才能保證得到最高產率的活性蛋白質。而且,在整個純化過程中,蛋白質最好都保持在低溫狀態。一般純化過程都在4°C進行,因為這個溫度既可以降低酶解速度(在含有蛋白酶的情況下),又可以保證蛋白質的結構完整性。
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紅色染料親和層析介質:紅色染料親和介質是將活性紅120共價結合到高流速瓊脂糖凝膠微球上的一種親和層析介質,活性紅120是一個多環染料,與自然產生的NADP+具有某些結構的相似性,可以強烈并且特異性結合寬范圍的蛋白質,如乳酸脫氫酶。能與紅色染料特異性結合的蛋白是由于它們需要核苷酸輔助因子。其他一些蛋白,例如白蛋白,脂蛋白,凝血因子和干擾素,是以非特異性方式與紅色染料相結合的,如芳香環陰離子配基的靜電力相互作用或者疏水鍵的相互作用。
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His-Tag純化時金屬螯合介質的選擇:1、科研微量制備——Ni Seplife HP(IDA),此層析填料分辨率高,科研微量制備可用此填料純化,純度更高。2、樣品中含有DTT或EDTA——Ni Seplife FF(TED),此填料可以耐受100mM的EDTA及10mM的DTT,樣品中含有EDTA及DTT時無需換液直接過鎳柱純化。3、樣品中含有8M尿素(6M鹽酸胍)——Ni Seplife FF(NTA),IDA耐受性差,TED結合力弱,在含有高濃度尿素時結合效率差,所以含有變性劑的樣品首選IMAC的鎳柱。