黑龍江層析介質(zhì)廠家供應(yīng)
發(fā)布時間:2022-06-26 01:58:22黑龍江層析介質(zhì)廠家供應(yīng)
同時半胱氨酸(Cys)的殘基上的巰基,色氨酸(Trp)的殘基上的吲哚基也可以Ni2+,Co2+等過渡金屬離子形成配位鍵而選擇性的結(jié)合在金屬螯合介質(zhì)上。金屬螯合親和層析介質(zhì):1、Ni Seplife FF(IDA);2、Ni Seplife 6FF(NTA);3、Ni Seplife FF(TED);4、Ni Seplife HP(IDA);5、IMAC Seplife FF(IDA)。
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表達體系對蛋白純化的影響:開始純化蛋白前應(yīng)先制備初始樣品。真正進行蛋白純化的操作之前,首要考慮是目的蛋白的來源。樣品來源可為原始樣品,例如肝臟,肌肉或腦組織。當(dāng)前,更為常見的是從重組來源的樣品純化蛋白質(zhì)。
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His-Tag融合蛋白是目前最常見的蛋白表達方式,而且很成熟,它的優(yōu)點是表達方便且不影響蛋白的活性,無論是可溶性表達或者包涵體都可以用固定金屬離子親和層析(IMAC)純化。IMAC是Porathetal.1975年用固定IDA作為配基的介質(zhì)螯合過渡金屬銅、鎳、鈷或鋅離子,可以吸附純化表面帶組氨酸、色氨酸或半胱氨酸殘基的蛋白。
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抗體純化親和層析介質(zhì):重組蛋白A可特異性與抗體的Fc區(qū)結(jié)合,用于單抗或多抗的分離純化,經(jīng)過一步層析,就可從腹水,血清或培養(yǎng)液等樣品中得到高純度的抗體。重組蛋白G可用于分離純化細(xì)胞培養(yǎng)液或細(xì)胞提取物中不同屬抗體或抗體的Fc片段,多位點活化偶聯(lián)減少了配體的泄露,用于IgG單克隆抗體的實驗室規(guī)模和工業(yè)化大規(guī)模純化,能迅速處理大體積樣品。