廣東層析介質(zhì)哪個(gè)品牌好
發(fā)布時(shí)間:2022-08-15 01:58:55廣東層析介質(zhì)哪個(gè)品牌好
His-Tag融合蛋白是目前最常見的蛋白表達(dá)方式,而且很成熟,它的優(yōu)點(diǎn)是表達(dá)方便且不影響蛋白的活性,無(wú)論是可溶性表達(dá)或者包涵體都可以用固定金屬離子親和層析(IMAC)純化。IMAC是Porathetal.1975年用固定IDA作為配基的介質(zhì)螯合過渡金屬銅、鎳、鈷或鋅離子,可以吸附純化表面帶組氨酸、色氨酸或半胱氨酸殘基的蛋白。
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隨著生物制藥工業(yè)的發(fā)展,各個(gè)廠家對(duì)下游工藝純化生產(chǎn)效率的要求逐漸提高。在實(shí)際生產(chǎn)過程中,具有高耐受壓力,高流速的分離介質(zhì)更具有優(yōu)勢(shì)。因此,近年來剛性結(jié)構(gòu)的層析填料在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用越來越多,在某些產(chǎn)品的純化中更優(yōu)于傳統(tǒng)的瓊脂糖葡聚糖類介質(zhì)。Seplife HM系列層析填料通過在特有的剛性骨架基礎(chǔ)上,對(duì)表面進(jìn)行親水改造,基團(tuán)鍵合等技術(shù),使填料具有親水性好,載量高,使用壽命長(zhǎng),流速高等特點(diǎn),與傳統(tǒng)層析填料相比,可大大提高下游純化工藝的生產(chǎn)效率,降低成本,創(chuàng)造出較好的經(jīng)濟(jì)效益。
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問:His標(biāo)簽蛋白鎳柱純化有雜帶怎么辦?1.樣品本身的的屬性,His蛋白容易被體系中的蛋白酶降解時(shí),此時(shí)就要在樣品中加入蛋白酶抑制劑。避免在純化過程中His蛋白被降解,呈現(xiàn)出蛋白純化后純度下降。
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蛋白質(zhì)純化工藝中的其他因素也會(huì)對(duì)蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性產(chǎn)生影響。對(duì)蛋白質(zhì)的處理步驟越少越好,在最短時(shí)間內(nèi)采用最少步驟的純化工藝才能保證得到最高產(chǎn)率的活性蛋白質(zhì)。而且,在整個(gè)純化過程中,蛋白質(zhì)最好都保持在低溫狀態(tài)。一般純化過程都在4°C進(jìn)行,因?yàn)檫@個(gè)溫度既可以降低酶解速度(在含有蛋白酶的情況下),又可以保證蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)完整性。