山西蛋白純化市場報價
發布時間:2022-08-18 01:58:56山西蛋白純化市場報價
Seplife?RP反相層析填料是以聚二乙烯基苯或聚丙烯酸酯為骨架以酯基、丁基、苯基、辛烷基或十八烷基為功能基的構成的聚合物填料。Seplife?RP反相層析填料由不同長度和極性的碳鏈提供與目標物之間的范德華力作為分離作用力,同時,較窄的孔徑分步屏蔽了分子大小的影響。使填料在分離過程中專一性更佳。在目標物的分子量不大于2000Da的條件下,可以在單純范德華力作用力下完成目標物與雜質的分離。
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His-Tag純化時金屬螯合介質的選擇:1、科研微量制備——Ni Seplife HP(IDA),此層析填料分辨率高,科研微量制備可用此填料純化,純度更高。2、樣品中含有DTT或EDTA——Ni Seplife FF(TED),此填料可以耐受100mM的EDTA及10mM的DTT,樣品中含有EDTA及DTT時無需換液直接過鎳柱純化。3、樣品中含有8M尿素(6M鹽酸胍)——Ni Seplife FF(NTA),IDA耐受性差,TED結合力弱,在含有高濃度尿素時結合效率差,所以含有變性劑的樣品首選IMAC的鎳柱。
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Ni Seplife FF(TED)——耐受性好,可以耐受100mM EDTA,非常適合真核外泌蛋白的純化。可直接使用NaOH在位清洗,無需脫鎳掛鎳,省時省力。含有8M尿素及6M鹽酸胍的樣品用此鎳層析填料影響結合,低豐度的樣品結合效率效率差。
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親和層析介質是一種根據生物分子之間的特異相互作用來分離蛋白的層析方法,如酶和底物、受體和配體、抗體和抗原。這種作用是特異性的也是可逆的,通過這種可逆的結合和分離來達到蛋白純化的目的
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預活化介質:環氧活化層析介質是將環氧基團鍵合在瓊脂糖FF上形成的一種活性中間體,可直接偶聯配基制備各類分離介質,用于生物大分子純化分離。溴化氫活化瓊脂糖層析介質是一種活化后的中間體,通過溴化氫和瓊脂糖上面的羥基反應生成活化的氰酸酯基團。蛋白質,多肽,氨基酸等可以偶聯到溴化氫活化4B/6B瓊脂糖介質上,應用較為廣泛。
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樣品的認知:在層析過程要對樣品做足夠的認知,包括樣品的濃度,樣品的組成等做一定的了解,如真核細胞分泌表達的樣品,要了解其上游工藝,培養基組成,培養過程等的一些添加劑是否對層析填料的性能及壽命衰減會有影響,及樣品的酸堿度,離子強度,濁度等做足夠的了解,必要的時候要進行再次澄清處理及體系置換。