西藏蛋白純化市場報價
發布時間:2022-08-24 01:58:58西藏蛋白純化市場報價
Ni Seplife FF(TED)——耐受性好,可以耐受100mM EDTA,非常適合真核外泌蛋白的純化。可直接使用NaOH在位清洗,無需脫鎳掛鎳,省時省力。含有8M尿素及6M鹽酸胍的樣品用此鎳層析填料影響結合,低豐度的樣品結合效率效率差。
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組氨酸(His)的殘基上帶有一個咪唑基團,可以和Ni2+,Co2+等過渡金屬離子形成配位鍵而選擇性的結合在金屬離子上,這些金屬離子能夠用螯合配體固定在層析介質上,因此帶有組氨酸標簽的蛋白在經過裝配了金屬離子的層析介質時可以選擇性的結合在介質上,而其他的雜質蛋白則不能結合或者僅能微弱結合。結合在介質上的HIS標簽蛋白可以通過提高緩沖液中的咪唑濃度進行競爭性洗脫,從而得到較高純度的HIS標簽蛋白。
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表達體系對蛋白純化的影響:開始純化蛋白前應先制備初始樣品。真正進行蛋白純化的操作之前,首要考慮是目的蛋白的來源。樣品來源可為原始樣品,例如肝臟,肌肉或腦組織。當前,更為常見的是從重組來源的樣品純化蛋白質。
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樣品的組份應滿足層析工藝且對層析填料的性能沒有影響,必要時可以用藍曉科技的凝膠過濾介質Seplife G-25 M介質對樣品進行置換體系處理。
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Seplife?RP反相層析填料是以聚二乙烯基苯或聚丙烯酸酯為骨架以酯基、丁基、苯基、辛烷基或十八烷基為功能基的構成的聚合物填料。Seplife?RP反相層析填料由不同長度和極性的碳鏈提供與目標物之間的范德華力作為分離作用力,同時,較窄的孔徑分步屏蔽了分子大小的影響。使填料在分離過程中專一性更佳。在目標物的分子量不大于2000Da的條件下,可以在單純范德華力作用力下完成目標物與雜質的分離。
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建立蛋白質純化工藝時,最重要的是需要考慮純化得到的蛋白質應能滿足其后續應用要求。蛋白質的含量及純度都必須滿足應用要求。而且,因為后續應用需要的是保持良好折疊結構的活性蛋白質,因此蛋白質活性的相關信息也需要考慮。在純化及后續的保存過程中,很多處理方法都會對蛋白質的性質產生影響,如蛋白質的去折疊、聚集、降解和失活等。制定詳細計劃,在最短時間內完成蛋白質純化,并在最穩定的條件下進行保存才算是成功地完成了其整個純化過程。