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發(fā)布時間:2022-09-27 01:58:38寧夏層析介質聯系電話地址
Seplife? Plasmid LX層析介質是藍曉科技自主研發(fā)的一種新型高度交聯的親硫芳香族瓊脂糖層析介質,用于純化超螺旋DNA,廣泛應用于基因治療和DNA疫苗的開發(fā)應用。該層析介質具有高流速、低反壓、非特異性吸附低、良好的親水性、化學穩(wěn)定性和機械性特點,方便進行規(guī)模放大,可縮短生產時間,提高生產效率。
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生物分子與親和層析介質上的配體通過共價鍵、范德華力、疏水力、靜電力等作用發(fā)生生物學專一性結合形成復合物,共價鏈接在載體表面的功能團配體上。蛋白質親和層析技術通過目標蛋白質與配體間通過特異性親和力吸附而達到分離純化的目的,具有生物專一性的特點,純化效率高。
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在生物制藥、結構研究、體外生物化學分析等很多應用中都需要進行蛋白質等生物分子純化。蛋白質可以從組織中獲取,亦或更經常的是從模式生物中過量表達獲得,如細菌、酵母或哺乳動物細胞培養(yǎng)等。蛋白質純化主要是根據它們理化性質的差異來從原料種進行分離純化,其目的就是獲得最多且高純度的功能蛋白質。一個好的蛋白質的純化過程必須要將其純化工藝步驟優(yōu)化至最少。
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在蛋白純化開始之前要對其進行穩(wěn)定性研究,溫度,pH,離子強度,添加劑及濃度的穩(wěn)定性研究一定要在純化蛋白之前就進行有效可靠的驗證。對溫度敏感型蛋白的純化制備盡可能在4度的環(huán)境中進行。同時對耐高溫的蛋白如糖化酶,可以利用此特性來在高溫下讓其它雜蛋白變性沉淀,目標蛋白活性無影響這一特性來純化蛋白。蛋白存在體系避免劇烈變化,在包涵體復性的過程有深刻體系,梯度逐漸減少變性劑可提高復性率。所以我們在純化蛋白時就要避免體系的劇烈變化。親和層析純化蛋白時,大多需要較低的pH洗脫,在收集洗脫峰的容器中墊緩沖液(常用1M的Tris),讓洗脫下來的蛋白迅速恢復到中性環(huán)境。避免純化過程中蛋白發(fā)生沉淀。
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Ni Seplife FF(TED)——耐受性好,可以耐受100mM EDTA,非常適合真核外泌蛋白的純化。可直接使用NaOH在位清洗,無需脫鎳掛鎳,省時省力。含有8M尿素及6M鹽酸胍的樣品用此鎳層析填料影響結合,低豐度的樣品結合效率效率差。