湖南蛋白純化聯系電話地址
發布時間：2022-10-08 01:58:10
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樣品的組份應滿足層析工藝且對層析填料的性能沒有影響，必要時可以用藍曉科技的凝膠過濾介質Seplife G-25 M介質對樣品進行置換體系處理。
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CHO細胞培養后先經過離心的方式去除細胞及細胞碎片，也可用微濾或者深層過濾的方式去除細胞及細胞碎片。去除細胞和細胞碎片后用rProtein A親和層析介質經親和層析捕獲，把單抗從培養液中快速的捕獲出來，此步驟可以去除大量的HCP，單抗去折疊片段，病毒及HCD和培養基組份物質。
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蛋白質純化工藝中的其他因素也會對蛋白質的穩定性產生影響。對蛋白質的處理步驟越少越好，在最短時間內采用最少步驟的純化工藝才能保證得到最高產率的活性蛋白質。而且，在整個純化過程中，蛋白質最好都保持在低溫狀態。一般純化過程都在4°C進行,因為這個溫度既可以降低酶解速度（在含有蛋白酶的情況下），又可以保證蛋白質的結構完整性。
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組氨酸（His）的殘基上帶有一個咪唑基團，可以和Ni2+,Co2+等過渡金屬離子形成配位鍵而選擇性的結合在金屬離子上，這些金屬離子能夠用螯合配體固定在層析介質上，因此帶有組氨酸標簽的蛋白在經過裝配了金屬離子的層析介質時可以選擇性的結合在介質上，而其他的雜質蛋白則不能結合或者僅能微弱結合。結合在介質上的HIS標簽蛋白可以通過提高緩沖液中的咪唑濃度進行競爭性洗脫，從而得到較高純度的HIS標簽蛋白。
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同時半胱氨酸（Cys)的殘基上的巰基,色氨酸（Trp)的殘基上的吲哚基也可以Ni2+,Co2+等過渡金屬離子形成配位鍵而選擇性的結合在金屬螯合介質上。金屬螯合親和層析介質：1、Ni Seplife FF(IDA)；2、Ni Seplife 6FF(NTA)；3、Ni Seplife FF(TED)；4、Ni Seplife HP（IDA)；5、IMAC Seplife FF(IDA)。
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預活化介質：環氧活化層析介質是將環氧基團鍵合在瓊脂糖FF上形成的一種活性中間體，可直接偶聯配基制備各類分離介質，用于生物大分子純化分離。溴化氫活化瓊脂糖層析介質是一種活化后的中間體，通過溴化氫和瓊脂糖上面的羥基反應生成活化的氰酸酯基團。蛋白質，多肽，氨基酸等可以偶聯到溴化氫活化4B/6B瓊脂糖介質上，應用較為廣泛。