北京層析填料批發(fā)價(jià)格
發(fā)布時(shí)間:2022-10-12 01:57:53北京層析填料批發(fā)價(jià)格
問:His標(biāo)簽蛋白鎳柱純化有雜帶怎么辦?1.樣品本身的的屬性,His蛋白容易被體系中的蛋白酶降解時(shí),此時(shí)就要在樣品中加入蛋白酶抑制劑。避免在純化過程中His蛋白被降解,呈現(xiàn)出蛋白純化后純度下降。
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凝膠過濾層析(SEC):凝膠過濾又稱為分子篩及體積排阻,凝膠過濾層析是根據(jù)蛋白質(zhì)具有不同的水力學(xué)半徑將它們進(jìn)行分離,該數(shù)據(jù)主要通過測(cè)量分子尺寸和形狀兩方面信息獲得。與其他層析過程不同的是,蛋白質(zhì)不與SEC介質(zhì)相結(jié)合,而是依靠它們通過惰性介質(zhì)的速度不同來完成分離。
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親和層析是一種根據(jù)生物分子之間的特異相互作用來分離蛋白的層析方法,如酶和底物、受體和配體、抗體和抗原。這種作用是特異性的也是可逆的,通過這種可逆的結(jié)合和分離來達(dá)到蛋白純化的目的。產(chǎn)品特點(diǎn):1、基于配體和分離物間的特異性親和作用,分離選擇性強(qiáng),效果好,純化倍數(shù)高。2、能完成一步方法很難完成的分離,如變性和非變性的,功能不同的蛋白。3、通常一步純化就可達(dá)到>90%的純度 速度快,操作簡(jiǎn)單。
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同時(shí)半胱氨酸(Cys)的殘基上的巰基,色氨酸(Trp)的殘基上的吲哚基也可以Ni2+,Co2+等過渡金屬離子形成配位鍵而選擇性的結(jié)合在金屬螯合介質(zhì)上。金屬螯合親和層析介質(zhì):1、Ni Seplife FF(IDA);2、Ni Seplife 6FF(NTA);3、Ni Seplife FF(TED);4、Ni Seplife HP(IDA);5、IMAC Seplife FF(IDA)。
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紅色染料親和層析介質(zhì):紅色染料親和介質(zhì)是將活性紅120共價(jià)結(jié)合到高流速瓊脂糖凝膠微球上的一種親和層析介質(zhì),活性紅120是一個(gè)多環(huán)染料,與自然產(chǎn)生的NADP+具有某些結(jié)構(gòu)的相似性,可以強(qiáng)烈并且特異性結(jié)合寬范圍的蛋白質(zhì),如乳酸脫氫酶。能與紅色染料特異性結(jié)合的蛋白是由于它們需要核苷酸輔助因子。其他一些蛋白,例如白蛋白,脂蛋白,凝血因子和干擾素,是以非特異性方式與紅色染料相結(jié)合的,如芳香環(huán)陰離子配基的靜電力相互作用或者疏水鍵的相互作用。