2019年12月新冠（COVID-19）疫情爆發，疫情發生之初，中國科研攻關組就將疫苗的研發作為主攻方向之一，為了更大限度的提升疫苗研發的成功率，在梳理分析不同的技術基礎和可能性之后，科研攻關組布局了病毒的滅活疫苗、核酸疫苗、重組蛋白疫苗、腺病毒載體疫苗、減毒流感病毒載體疫苗這樣五條技術路線。
病毒滅活疫苗是最為成熟的疫苗生產技術，也是最傳統的經典技術路線：即在體外培養新冠病毒，然后將其滅活，使之沒有毒性，但這些病毒的“尸體”仍能刺激人體產生抗體，使免疫細胞記住病毒的模樣。
代表企業：
北京科興中維生物技術有限公司
北京生物制品研究所有限責任公司
武漢生物制品研究所有限責任公司
中國醫學科學院醫學生物學研究所（昆明所）
新冠病毒滅活疫苗生產流程主要包括：臨床樣品獲取——穩定毒株細胞培養——病毒收獲及澄清——病毒滅活——純化——無菌處理——制劑——灌裝。
圖1：新冠病毒滅活疫苗生產過程（來源：網絡）
新冠病毒滅活疫苗下游工藝解決方案
圖2：新冠病毒滅活疫苗下游工藝解決方案（自制）
圖3:Seplife? Suncore 700(多模式復合型層析）+Seplife 4FF(凝膠過濾層析）串聯純化新冠病毒滅活疫苗。（自制）
圖4：Seplife large scale Q HP(高剛性高分辨率陰離子交換層析）粗純+Seplife 4FF(凝膠過濾層析）精純新冠病毒滅活疫苗。（自制）
圖5：TFF超濾+Seplife 4FF(凝膠過濾層析）純化新冠病毒滅活疫苗。（自制）
新冠病毒滅活疫苗純化的主要三種工藝路線，當然條條大路通羅馬，具體采用那種工藝路線還要根據實際情況（硬件設置，車間設計，對每種技術的掌握程度，成本，經濟效益等）進行適當的的調整。
純化過程注意事項：
1.微載體培養是目前公認最具發展前途的一種動物細胞大規模培養技術，其兼具懸浮培養和貼壁培養的優點，且容易放大。藍曉科技的微載體廣泛應用在疫苗、單抗、基因治療病毒載體等生物制品的大規模生產中，藍曉科技自主研發的Seplife? LX-MC-dex1細胞培養微載體幾乎適合所有貼壁細胞（如Vero、CHO、293T及MDCK等），細胞可貼附微球 2D 表面生長，1g的Seplife? LX-MC-dex1微載體提供 4400 cm2的表面積給細胞貼附。
圖6：Seplife? LX-MC-dex1細胞培養微載體培養效果（來源：藍曉科技）
2.Seplife? Suncore 700填料是多模式復合型介質，病毒溶液進入柱床中，分子尺寸大的病毒顆粒被排阻在填料惰性層外面流穿而過，分子尺寸小的HCP,HCD，內毒素等物質進入到孔內和填料以靜電力，疏水作用力等結合，可以實現高上樣量，但是部分HCP（如帶正電荷的蛋白）和病毒粒子一起流穿，故這種層析很難實現高純度，在新冠病毒滅活疫苗純化上還需要配合其它層析（如凝膠過濾層析）一起實現高效率高純度。
3.多模式復合型層析高上樣量和高純化效率的病毒純化方式凝膠過濾層析串聯，即可以實現高上樣量，又可以實現高純化倍數，高純度，合理的搭配可以提高效率，提高品質。
4.Seplife 4FF凝膠過濾層析是病毒類疫苗純化最主要最經典的方式之一，有超過80%的病毒疫苗采用此方式進行純化（如狂犬疫苗，流感疫苗，森林腦炎疫苗等）。同樣新冠疫苗可以經過濃縮后直接用Seplife 4FF一步層析純化，也可以先用Seplife large scale Q HP(高剛性高分辨率瓊脂糖微球陰離子交換介質）進行吸附病毒的方式進行粗純及濃縮以減少體積，在配合Seplife 4FF填料純化。
5.Seplife large scale Q HP(高剛性高分辨率瓊脂糖微球陰離子交換介質），大多數病毒包括COVID-19在中性pH環境中都帶負電荷，可以用此填料進行吸附——洗脫模式粗純。粗純后體積減小，在進行Seplife 4FF凝膠過濾層析精純，也可以達到高效的純化過程。
6.凝膠過濾層析上樣量通常在柱床體積的5%以內，為了提高工作效率，Seplife 4FF層析可采用連續上樣的方式提高工作效率。
7.TFF超濾可實現縮小體積的作用，同時在濃縮時不斷向原液中添加緩沖液，反復洗濾即可實現濃縮又可實現粗純的目的，但是TFF使用時相比層析技術有比較高的剪切力，所以還需要全面權衡選擇合適的方法。TFF結合Seplife 4FF是病毒類生物制品純化的經典工藝技術，但是需要綜合考慮經濟效益，全球新冠疫情仍在蔓延，人類對高品質疫苗的迫切需求，促使當前疫苗制備過程中收率的格外重要，TFF過程中會損失部分收率，故當前特殊時期，新冠滅活疫苗采用圖4和圖5的工藝過程更多一些。
一家之言，難免疏誤！請您指正！
新冠病毒滅活疫苗純化介質
Seplife 4FF
Seplife large scale Q HP
Seplife? Suncore 700
細胞培養微載體
Seplife? LX-MC-dex1
蘇州藍曉生物科技有限公司，生物制藥下游工藝解決方案專業供應商！
—— 代表產品 ——
?高流速瓊脂糖介質
離子交換填料：DEAE/Q/CM/SP seplife? FF等
凝膠過濾填料：seplife? 4FF/6FF等
疏水填料：Phenyl/Butyl seplife? FF等
親和填料：Ni/Blue/rProtein A seplife? FF等
?超高載量瓊脂糖介質
DEAE/Q/CM/SP seplife? XL等
?葡聚糖介質
凝膠過濾填料：seplife? G25/G50/G75等
離子交換填料：DEAE/Q seplife? A25/A50等
CM/SP seplife? C25/C50等
?高剛性瓊脂糖介質
seplife? large scale Q/SP/DEAE等
?聚合物介質
seplife?RP/IEX/HIC等
?多模式介質
seplife? large scale MMC/MMC(Ⅱ）等
seplife? large Suncore 700等
seplife? LH-20等
?細胞培養微載體
seplife? LX-MC-dex 1等
?核酸固相合成載體
交聯苯乙烯（羥基、氨基）等
?多肽合成載體
Merrifield樹脂/Wang 樹脂等
?酶固定化載體
seplife? LX-505P/LX-1000EP/EP200等
現高流速瓊脂糖介質，超高載量瓊脂糖介質，高剛性瓊脂糖介質，葡聚糖介質，單分散聚合物介質，多模式介質，細胞培養微載體，核酸固相合成載體，多肽固相合成載體，酶固定化載體等年產均超過50000升。
