Seplife CL-4B瓊脂糖層析介質是用4%交聯瓊脂糖制備成的凝膠顆粒,本產品為傳統的瓊脂糖層析介質,具有非特異性吸附低,回收率高,可多次重復使用等特點,可用于分子量差異大、對分辨率要求不高的樣品的凝膠層析純化。
產品牌號 | Seplife CL-4B |
外觀 | 白色球狀凝膠,無臭無味 |
基質 | 4%交聯瓊脂糖凝膠 |
pH穩定性 | 3~13(長期),2~14(短期,在位清洗[CIP]) |
化學穩定性 | 可耐8mol/L 尿素、6mol/L 鹽酸胍;有機溶劑,如:乙醇、DMF、THF、DMS、氯仿、丙酮、吡啶、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、乙腈 |
排阻極限 | 60000~20×106(球蛋白) |
粒徑(um) | 45~165 |
耐壓流速*(cm/h) | 80~150cm/h (在0.15Mpa) |
耐熱性 | 120℃,pH7水中30min |
應用 | 用于生物制藥和生物工程下游蛋白質、核酸及多肽的凝膠過濾層析純化 |
*檢測條件:層析柱16mm×300mm;*柱床高10cm;溫度25℃;流動相為0.1mol/L NaCl。
使用方法
3.1 裝柱
裝柱按照標準操作規程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。
3.2平衡
使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子,務必使流出液的電導和pH同上樣緩沖液的電導和pH完全一致。
3.3上樣
(1)樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理,再上樣。
(2)介質對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的,分子量大的先流出來。
(3)上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離效果越好。
3.4洗脫
用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
3.5再生
一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。一些失活蛋白或者脂類在再生時洗不下來,可用如下方法清洗去除。
3.6清洗
(1)對于沉淀蛋白、非特異性吸附蛋白和脂蛋白,可用0.5M NaOH清洗去除;
(2)對于非特異性吸附較強的蛋白、脂蛋白和脂類,可先用2倍柱床體積的非離子去污劑(0.1%)清洗,然后用2~3倍柱床體積的緩沖液清洗直至pH和電導保持不變。
3.7存儲
保存在4~8℃,20%乙醇溶液中,不可冷凍。
3.8運輸
運輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴禁與有毒、有害物品混運。
4.注意事項
(1)使用凝膠過濾前應盡可能將樣品體積濃縮。
(2)樣品必須澄清沒有顆粒。
(3)為了得到最高的分辨率,上樣體積不能超過柱床體積的5%。
(4)樣品與層析介質必須用洗脫緩沖液徹底平衡后,才能進行柱層析。
(5)所裝的柱床必須表面平整,無溝流及氣泡,否則應重裝。
(6)為了保護蛋白的穩定性和活性,需選擇一種緩沖液純化蛋白。
(7)為了避免蛋白和介質之間非特異性的離子相互作用,緩沖液中最高可加入0.15mol/L NaCl。
(8)洗脫過程中應嚴格控制流速,且勿過快。
(9)加樣及整個洗脫過程中,嚴防柱面變干。
(10)本品應避免與氧化劑接觸,避免長時間暴露在空氣中。
產品牌號 | 貨號 | 包裝規格 |
Seplife CL-4B | A1002102 | 25ml |
A1002103 | 100ml | |
A1002104 | 500ml | |
A1002105 | 1L | |
A1002106 | 5L | |
A1002107 | 10L |
生產日期:見標簽
使用期限:在適當的貯藏條件下可貯藏5年
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