Seplife LX-MC-Dex1是藍曉科技自主研發的一種適用于細胞貼附生長的微珠載體,它以Seplife G50為基質,表面覆蓋帶正電荷的DEAE基團。Seplife LX-MC-Dex1是當前用途最廣的一種微載體,適應培養的細胞類型60余種,主要用于生產疫苗、蛋白質產品等。
產品牌號 | Seplife LX-MC-Dex1 |
外觀 | 白色顆粒,無臭無味 |
浮力密度*(g/ml) | <1.045 |
顆粒大小(μm) | 干粉:60-87μm占比 >70%;濕膠*:145-240 |
生理鹽水中 | 145-240 |
離子交換量(mmolCl-/g干粉) | 1.4-1.6 |
溶 脹*(ml/g干粉) | 17-22 |
干燥失重 | < 10% |
微生物菌落(CFU/g) | < 100 |
重金屬含量(ug/g) | <5 |
有效培養面積*(cm2/g) | 3500-5500 |
功能性測試,vero細胞,測試組與對照組斜率比值 | >0.8 |
應用 | 適合貼壁依賴型細胞的懸浮培養,用于生產疫苗及蛋白等 |
* 生理鹽水中
使用方法
3.1微載體預處理
首先,干燥的微載體在無Ca2+ 和Mg 2+ 的磷酸緩沖液(PBS,pH=7.4)(每克微載體加50-100ml)中在室溫下浸泡膨脹至少3小時。然后,棄去上清液,用新配制的無Ca2+ 、Mg 2+ 的PBS(pH=7.4)(每克微載體加30-50ml)洗滌微載體數分鐘。接著,棄去PBS,換上新的無Ca2+ 、Mg2+ 的PBS(pH=7.4)(每克微載體加30-50ml)。之后,微載體溶液用高壓滅菌法滅菌(115℃,15min,15psi)。 微載體LX-MC-dex1非常穩定,可以反復(至少5次)長時間(130°C,12h,27psi)進行高壓滅菌而不影響其性能。滅菌結束后使用前,加入培養基潤洗置換(20-50ml/g),之后加入10%血清放置過夜。
3.2微載體培養
準備好消化好的細胞,連同之前準備好的微載體一起加入方瓶或反應器中(微載體加量1-5g/L),在一定條件下開始培養,4小時后觀察細胞貼附情況。如果細胞貼附良好,繼續跟蹤培養,觀察細胞生長情況。
3.3微載體培養操作要點
(1)培養初期:保證培養基與微球體處于穩定的pH與溫度水平,接種細胞(對數生長期,而非穩定期)至終體積1/3的培養液中,以增加細胞與微載體接觸的機會。常使用2-3g/L的微載體含量,更高的微載體濃度需要控制環境或經常換液。
由于動物細胞無細胞壁,對剪切力敏感,因而無法靠提高攪拌轉速來增加接觸概率。通常的操作方式是:在貼壁期采用低攪拌轉速,時攪時停;數小時后,待細胞附著于微載體表面時,維持設定的低轉速,進入培養階段。微載體培養的攪拌非常慢,最大速度75r/min。
(2)貼壁階段(3-8d)后,緩慢加入培養液至工作體積,并且增加攪拌速度保證完全均質混合。
(3)培養維持期:進行細胞計數(胞核計數)、葡萄糖測定及細胞形態鏡檢。隨著細胞增殖,微球變得越來越重,需增加攪拌速率。經過3d左右,培養液開始呈酸性,需換液。具體方法:停止攪拌,讓微珠沉淀5min,棄掉適宜體積的培養液,緩慢加入新鮮培養液(37℃),重新開始攪拌。
(4)收獲細胞:首先,排干培養液,至少用緩沖液漂洗1遍;然后,加入相應的酶,快速攪拌(75-125r/min)20-30min;最后,解離收集細胞及其產品。
(5)微載體培養的放大:可以通過增加微載體的含量或培養體積進行放大。使用異倍體或原代細胞培養生產疫苗、干擾素,已被放大至4000L以上。
存儲
貯存于4~30℃、干燥、通風、清潔處。
運輸
運輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴禁與有毒、有害物品混運。
注意事項
本產品避免與氧化劑接觸。
產品牌號 | 貨號 | 包裝規格 |
Seplife LX-MC-Dex1 | D6007310 | 25g |
D6007311 | 100g | |
D6007312 | 500g | |
D6007313 | 1kg | |
D6007316 | 5kg | |
D6007314 | 10kg |
生產日期:見標簽
使用期限:在適當的貯藏條件下可貯藏5年
注冊人名稱/生產企業:西安藍曉科技新材料股份有限公司
注冊人住址/生產地址:西安市高新開發區錦業路135號藍曉科技園
售后服務單位:西安藍曉科技新材料股份有限公司
郵政編碼:710076
聯系電話:86-29-8110 4050
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注冊人名稱/銷售企業:蘇州藍曉生物科技有限公司
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