Seplife? RP LXMS-30(300)是藍曉科技自主研發的一款中高壓色譜填料,是以聚苯乙烯/二乙烯基苯為基質的多孔高聚物,其具有比表面積大、優良的化學、物理穩定性等特點。與傳統反相硅膠填料不耐酸堿,pH操作范圍窄相比,Seplife? RP LXMS-30(100)擁有高流速、高動態載量的優點, 非常適合快速高效層析的應用,在提高用戶生產效率的同時,進一步降低了用戶的生產成本。廣泛應用于小分子化合物、多肽、低分子量的蛋白和其他生物分子進行反相色譜(reversed phase chromatography RPC)分離。
產品牌號 | Seplife? RP LXMS-30(100) |
外觀 | 白色球狀顆粒 |
化學結構 | |
基質 | 聚苯乙烯-二乙烯基苯 |
粒徑(μm) | 30±3 |
平均孔徑(?) | 100 |
濕視密度 (g/ml) | 0.80-0.90 |
含水量 (%) | 50-80 |
推薦工作流速(cm/h) | 100-1000 |
pH穩定性 | 2~12(長期),1~14(短期,在位清洗[CIP]) |
化學穩定性 | 對常用的水性緩沖液穩定,1M HCl, 1M HCl/90%甲醇,90% HAc,6M GuHCl, 100%正丙醇,100%乙醇,100%甲醇,100%丙酮,0.45MNaOH/40% 2-丙醇,1.0 M NaOH3,0.1% TFA在水中,0.1% TFA在乙腈中,100%異丙醇,100%四氫呋喃 |
動態載量(mg/ml) | 32-40 mg(VB12); 30~60 mg (IN) |
耐壓(Mpa) | 4 |
存儲 | 20%乙醇溶液,4℃至30℃ |
使用方法
勻漿濃度等于靜置膠體積除以除以勻漿后的總體積。采用0.5M NaCl勻漿可獲得最佳裝柱效果,其濃度為60%-70%。方法如下:
1)色譜柱的柱體積 V,V=Ac×L,Ac=π×r2。
Ac:色譜柱橫截面積;L:色譜柱高度;r:色譜柱半徑。
2) 攪動介質形成勻漿液,量取所需質量或體積。其為柱體積的1.2倍左右,防止收縮。
3)用 0.5 M NaCl 溶液置換20%乙醇,平衡過夜。
4)裝柱之前,用 0.5 M NaCl 溶液調整勻漿濃度為 65 ~ 70%;將勻漿一次性倒入層析柱,沉降平衡后標注高度。
5)將分配器裝入,調節高度使得壓縮系數為 1.05 ~ 1.10;然后啟動輸液泵,用 1.5~2 倍工作流速使柱床穩定。
6)按照 SOP 進行柱效和對稱性的測定,須達到預定標準。
3.2 柱效評價
裝好之后,色譜柱用3-5CV超純水清洗。流速控制1-5cm/min平衡并進行柱效測試。
離子交換層析柱的柱效測試方法
樣品: 2 M NaCl 溶液
上樣量: 1~5 % 柱體積
洗脫液: 0.5 M NaCl 溶液
線性流速: 100 cm/h
檢測: UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上樣:電導檢測儀
3.3 清洗
裝好的色譜柱應使用至少使用5CV的去離子水清洗。
3.4平衡
裝柱后先用流動相平衡3-4CV,流速控制1-5cm/min,直到流穿的電導和pH保持不變方可進行上樣。
3.5上樣
固體樣品可用平衡液溶解配制;低濃度樣品溶液盡量提前濃縮;高濃度樣品溶液可用平衡液稀釋。同時為了避免堵塞層析柱,樣品需要(離心或膜過濾)澄清處理。上樣量根據介質的載量和樣品中目標蛋白的濃度估算,上樣前請確保目標物緩沖液應盡可能與平衡液一致。首次試驗可減小上樣量,之后可根據目標物保留時間和峰型增加上樣量。
3.6 洗脫
采用2-10CV的甲醇、乙醇、乙腈、丙酮等的(含水)溶液溶出,用酸、堿、緩沖液等調節PH值或兩者并用使有效成分洗脫。
3.7再生清洗(CIP)
先使用乙醇、丙酮、堿+乙醇等溶劑按操作流速沖洗3-4CV,然后用流動相平衡清洗3-4CV。
3.8 應用案例
Seplife? RP LXMS-30 具高流速、高動態載量的特點,非常適合快速高效層析的應用。同時,優異的分辨率使其在精細純化階段具有比傳統離子交換層析介質更好的雜質去除能力。使用小分子茶堿驗證層析柱分辨率,圖1分別顯示了Seplife? RP LXMS-30 (A)與國際之名填料(B)同樣具有優異的分辨率;圖2和圖3分別顯示了Seplife? RP LXMS-30 (A)與國際之名填料(B)在分離標準蛋白的分離效果圖譜。
圖1 A:Seplife? RP LXMS-30(300) 分離茶堿圖譜 B:國際某知名填料分離茶堿圖譜
圖2 Seplife? RP LXMS-30(300) 分離標準蛋白圖譜
圖3 國際某知名填料分離標準蛋白圖譜
4.存儲
暫時不使用的層析介質需保存在 4~30 ℃ 的 20-25%乙醇中。
5.運輸
運輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴禁與有毒、有害物品混運。
產品牌號 | 貨號 | 包裝規格 |
Seplife? RP LXMS-30(300) | PS00042X(30)2-1 | 25ml |
PS00042X(30)2-2 | 100ml | |
PS00042X(30)2-3 | 500ml | |
PS00042X(30)2-4 | 1L | |
PS00042X(30)2-5 | 5L | |
PS00042X(30)2-6 | 10L |
生產日期:見標簽
使用期限:在適當的貯藏條件下可貯藏5年
注冊人名稱/生產企業:西安藍曉科技新材料股份有限公司
注冊人住址/生產地址:西安市高新開發區錦業路135號藍曉科技園
售后服務單位:西安藍曉科技新材料股份有限公司
郵政編碼:710076
聯系電話:86-29-8110 4050
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官方網站:www.sunresin.com
注冊人名稱/銷售企業:蘇州藍曉生物科技有限公司
注冊人地址/銷售地址:蘇州市區工業園區裕新路108號5樓525室
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