Seplife? Oligo dT是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一種新型高剛性聚合物親和填料，主要用于捕獲mRNA? Seplife?Oligo dT以聚苯乙烯為基 質(zhì)，具有均一的超大孔徑，表面進(jìn)行了特定的長(zhǎng)鏈間隔臂修飾并鍵合了自主開(kāi)發(fā)dT配基，具有較高的載量和特異性結(jié)合力，非特異性吸附 低，可耐受高溫（65t ）。

技術(shù)指標(biāo)

使用方法

3.1 裝柱

根據(jù)填料壓縮因子，勻漿比例50-70%，層析柱內(nèi)徑和實(shí)際需求，量取填料，一般填料需要沉降靜置4h讀取體積。用0.1mol/L NaCl或者平衡緩沖液進(jìn)行裝柱。必須保證每種材料都處于工作溫度，所用緩沖液，填料使用前均需要脫氣，填料需要一次倒入裝柱器或者柱管內(nèi)，避免多次加料。

Seplife? Oligo dT具有良好的剛性，可以填充在低壓玻璃柱和高壓不銹鋼柱中。填料的壓縮因子范圍建議為1.06-1.5。

對(duì)于直徑較小的柱子(≤1cm)，我們建議裝柱流速1000 - 2000cm/h；或者使用實(shí)際操作系統(tǒng)最大操作流速至少50%的流速裝柱。一般壓柱至少3CV。

層析柱裝填好，用裝填溶液淋洗柱床2-3CV，流速為實(shí)際使用流速，以使柱床穩(wěn)定。

為了避免損壞柱床，運(yùn)行時(shí)的壓力，不能超過(guò)裝柱壓力的80%。

3.2柱效測(cè)定

常用測(cè)試柱效的方法：

備注：一般上樣前用流動(dòng)相至少平衡4CV。

3.3平衡

使用3–4 CV平衡緩沖液平衡柱子，常用緩沖液為10 mM Tris-HCl,0.5 M NaCl, 1 mM EDTA, pH 7.4.

3.4 樣品準(zhǔn)備

mRNA樣品用平衡緩沖液混勻，常用緩沖液為10mMTris-HCl, 0.5M NaCl, 1mM EDTA, pH 7.4。

如需變性，可將樣品置于65℃的水浴中加熱10-15min，然后立即將樣品置于冰上。

3.3上樣

以50-150 cm/h的流速上樣。

3.4淋洗

首先，用平衡緩沖液10mMTris-HCl, 0.5M NaCl, 1mM EDTA, pH 7.4淋洗2-3 CV。

然后，用10 mM Tris-HCl,100-300 mM NaCl, 1 mM EDTA, pH 7.4，淋洗3-5 CV，直至電導(dǎo)走平。

3.5洗脫

一般洗脫結(jié)合的mRNA用3-5 CV，10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA, pH 7.4 ；或者使用超純水3-5 CV，進(jìn)行洗脫。

備注：提高溫度至65℃，可以有效提高洗脫速率。

3.6再生

再生緩沖液需要根據(jù)樣品的純度、組成確定。

常用超純水3-5 CV。

對(duì)于結(jié)合較強(qiáng)的雜質(zhì)需要使用含0.5M NaOH的20-30%乙醇溶液清洗3-5 CV。

3.7在位清洗

先用3-5CV 0.1M NaOH沖洗，再用平衡緩沖溶液清洗3-5CV，直至電導(dǎo)不變。

3.8存儲(chǔ)

密封保存在2~8℃（保存溶液為20%乙醇）干燥、通風(fēng)、清潔處，不可冷凍；用過(guò)的柱子保存在2~8℃，20%乙醇溶液中。

3.9運(yùn)輸

運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。

訂購(gòu)信息

生產(chǎn)日期：見(jiàn)標(biāo)簽

使用期限：在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年

注冊(cè)人名稱/生產(chǎn)企業(yè)：西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司

注冊(cè)人住址/生產(chǎn)地址：西安市高新開(kāi)發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園

售后服務(wù)單位：西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司

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聯(lián)系電話：86-29-8110 4050

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