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林芝Seplife? LXMS 50S

基本信息

Seplife? LXMS 50S作為一種強陽離子交換層析填料,以聚苯乙烯-二乙烯基苯為基架,基架表面親水處理。該層析介質在傳統陽離子交換劑的基礎上進行重大改進高,降低了介質非特異性吸附,可耐高壓并在高流速下操作,同時高的分離度和分辨率可使得產物產量更高并加強雜質清除……
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Seplife? LXMS 50S作為一種強陽離子交換層析填料,以聚苯乙烯-二乙烯基苯為基架,基架表面親水處理。該層析介質在傳統陽離子交換劑的基礎上進行重大改進高,降低了介質非特異性吸附,可耐高壓并在高流速下操作,同時高的分離度和分辨率可使得產物產量更高并加強雜質清除。穩健的耐鹽性可加強流 程的靈活性、校準的準確性并簡化工作流程。除此之外,高動態的結合載量,可減少柱床裝填體積,節省緩沖液用量和循環。廣泛用于單克隆抗體、重組蛋白、疫苗、血液制品、病毒、DNA以及多肽類產品的分離和純化。

產品牌號

Seplife? LXMS 50S

外觀

白色不透明球狀顆粒,無臭無味

種類

強陽離子交換填料

基質

聚苯乙烯 二乙烯苯

配基

磺酸基

d50v(μm)

50

壓力流速*(cm/h)

200-800

pH穩定性

2~12(長期),1~14(短期,在位清洗[CIP])

化學穩定性

所有常用的離子交換緩沖液

離子交換量(mmol /ml)

0.16-0.20

動態載量(mg/ml)

≧102(h-IgG)

最大耐壓(bar)

30

*檢測條件:層析柱16mm×200mm;*柱床高10cm;溫度25℃;流動相為0.1mol/L NaCl


使用方法

3.1 裝柱

勻漿濃度等于靜置膠體積除以除以勻漿后的總體積。采用0.5M NaCl勻漿可獲得最佳裝柱效果,其濃度為60%-70%。方法如下:

1)色譜柱的柱體積 V,V=Ac×L,Ac=π×r2。

Ac:色譜柱橫截面積;L:色譜柱高度;r:色譜柱半徑。

2) 攪動介質形成勻漿液,量取所需質量或體積。其為柱體積的1.2倍左右,防止收縮。

3)用 0.5 M NaCl 溶液置換20%乙醇,平衡過夜。

4)裝柱之前,用 0.5 M NaCl 溶液調整勻漿濃度為 65 ~ 70%;將勻漿一次性倒入層析柱,沉降平衡后標注高度。

5)將分配器裝入,調節高度使得壓縮系數為 1.05 ~ 1.10;然后啟動輸液泵,用 1.5~2 倍工作流速使柱床穩定。

6)按照 SOP 進行柱效和對稱性的測定,須達到預定標準。 

3.2 柱效評價 

裝好之后,色譜柱用3-5體積超純水清洗。100cm/h流速平衡并進行柱效測試。

離子交換層析柱的柱效測試方法

樣品:      2 M NaCl 溶液 

上樣量:    1~5 % 柱體積 

洗脫液:    0.5 M NaCl 溶液 

線性流速:  100 cm/h 

檢測:      UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上樣:電導檢測儀

3.3 清洗 

裝好的色譜柱應使用至少使用5BV的去離子水清洗。 

3.4 平衡 

使用適當的5-10倍柱體積緩沖液進行柱子的平衡,至流出液電導和PH不變(與平衡液一致),緩沖液 如 Buffer A,如 20 mM PBS, pH7.0,具體的緩沖體系應根據目標蛋白的穩定性和等電點、離子交換介質的種類進行篩選和優化。 

3.5上樣 

固體樣品可用平衡液溶解配制;低濃度樣品溶液可用平衡液透析;高濃度樣品溶液可用平衡液稀釋。為了避免堵塞層析柱,樣品應經離心或膜過濾處理。進料量根據介質的載量和料液中目標蛋白的含量計算,上樣前確保樣品緩沖液應盡可能與平衡液一致。 

3.6洗脫 

上樣完畢后繼續用平衡緩沖液淋洗至基線穩定,可以根據實際情況采取提高鹽濃度或改變流動相 pH 的方法依次洗脫吸附于層析介質上的樣品。 

3.7再生 

每次層析之后可用0.5-2 M NaCl 清洗層析柱,除去強結合于層析介質上的蛋白。 

3.8 在位清洗 

為了保持層析柱的性能,若有蛋白質或其他雜質在再生過程中未能有效去除,可執行在位清洗步驟,在位清洗時,也可采用反向沖洗的方法,具體操作步驟如下: 

(1)對于通過離子鍵結合過強的蛋白,可用3BV以上的2M NaCl 清洗,并用3BV以上的去離子水清洗; 

(2)對沉淀蛋白、以疏水性結合的蛋白或脂蛋白,可用0.2~0.5 M NaOH 清洗(與層析介質接觸時間 1~2 h),并用5BV以上平衡液和3BV以上的去離子水清洗; 

(3)對強疏水性結合的蛋白、脂蛋白和脂類物質,可用5BV以上的50%乙醇或 30%異丙醇清洗(與層析介質接觸時間0.5-1 h),并用5 BV以上的去離子水清洗。也可用含非離子表面活性劑的堿性或酸性溶液清洗,如0.1~0.5%的 Triton X-100 + 0.1 M乙酸清洗 1-2 h,并用5BV以上的50%乙醇沖洗去除去污劑,然后用5BV以上的純水沖洗(使用高濃度的有機溶劑時,為了避免產生氣泡,應采用逐步增加有機溶劑濃度的方法)。 

4.存儲

暫時不使用的層析介質需保存在 4~30℃ 的 20%乙醇中,已經裝好的層析柱應保存在含 20%乙醇的緩沖液(pH 7.0);使用前請裝柱后將乙醇清洗干凈。

5.運輸

運輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴禁與有毒、有害物品混運。


產品牌號

貨號

包裝規格

Seplife? LXMS 50S 

PS30124X(50)1-1

25ml

PS30124X(50)1-2

100ml

PS30124X(50)1-3

500ml

PS30124X(50)1-4

1L

PS30124X(50)1-5

5L

PS30124X(50)1-6

10L

生產日期:見標簽

使用期限:在適當的貯藏條件下可貯藏5年

注冊人名稱/生產企業:西安藍曉科技新材料股份有限公司

注冊人住址/生產地址:西安市高新開發區錦業路135號藍曉科技園

售后服務單位:西安藍曉科技新材料股份有限公司

郵政編碼:710076

聯系電話:86-29-8110 4050

傳真:029-8669 1600-8254

官方網站:www.sunresin.com

注冊人名稱/銷售企業:蘇州藍曉生物科技有限公司

注冊人地址/銷售地址:蘇州市區工業園區裕新路108號5樓525室

聯系電話:0512-65160522


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