Seplife 6B層析介質(zhì)是用6%瓊脂糖制備成的凝膠顆粒，本產(chǎn)品為傳統(tǒng)的瓊脂糖層析介質(zhì)，具有非特異性吸附低，回收率高，可多次重復(fù)使用等特點，可用于分子量差異大、對分辨率要求不高的樣品的凝膠層析純化。

＊檢測條件：層析柱16mm×300mm；＊柱床高10cm；溫度25℃；流動相為0.1mol/L NaCl。

使用方法

3.1 裝柱

裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度，凝膠裝柱前需要脫氣。

3.2平衡

使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子，務(wù)必使流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。

3.3上樣

（1）樣品用緩沖液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理，再上樣。

（2）介質(zhì)對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的，分子量大的先流出來。

（3）上樣體積約為柱體積的1~2%，越小分離效果越好。

3.4洗脫

用緩沖液洗脫，洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。

3.5再生

一般用緩沖液洗到平衡，可再次使用。

3.6清洗

（1）對于沉淀蛋白、非特異性吸附蛋白和脂蛋白，可用0.5M NaOH清洗去除；

（2）對于非特異性吸附較強的蛋白、脂蛋白和脂類，可先用2倍柱床體積的非離子去污劑（0.1%）清洗，然后用2~3倍柱床體積的緩沖液清洗直至pH和電導(dǎo)保持不變。

3.7存儲

保存在4~8℃，20%乙醇溶液中，不可冷凍。

3.8運輸

運輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴禁與有毒、有害物品混運。

4.注意事項

（1）使用凝膠過濾前應(yīng)盡可能將樣品體積濃縮。

（2）樣品必須澄清沒有顆粒。

（3）為了得到最高的分辨率，上樣體積不能超過柱床體積的5%。

（4）樣品與層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后，才能進行柱層析。 

（5）所裝的柱床必須表面平整，無溝流及氣泡，否則應(yīng)重裝。

（6）為了保護蛋白的穩(wěn)定性和活性，需選擇一種緩沖液純化蛋白。

（7）為了避免蛋白和介質(zhì)之間非特異性的離子相互作用，緩沖液中最高可加入0.15mol/L NaCl。

（8）依據(jù)目標(biāo)蛋白的分子量，選擇介質(zhì)分離范圍中值最接近的那種介質(zhì)。

（9）洗脫過程中應(yīng)嚴格控制流速，且勿過快。

（10）加樣及整個洗脫過程中，嚴防柱面變干。

（11）本品應(yīng)避免與氧化劑接觸，避免長時間暴露在空氣中。

生產(chǎn)日期：見標(biāo)簽

使用期限：在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年

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