Blue Seplife FF層析介質是藍曉科技自主研發的一種新型親和層析介質,它是將藍色染料汽巴蘭(Cibacron Blue 3G-A)偶聯到高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質上。Blue Seplife FF與目標蛋白的結合主要是配基提供的電子對與疏水作用的綜合結果。該介質具有良好的化學穩定性,基團脫落少,使用壽命長,使用方便,應用非常廣泛,可用于白蛋白、干擾素、凝血因子以及各種需要NAD+和NADP+酶的分離純化。
產品牌號 | Blue Seplife FF |
外觀 | 白色球狀,無臭無味 |
基質 | Seplife 6FF |
配基 | 汽巴蘭 |
最高流速(cm/h) | 750 |
粒徑(μm) | 45~165 |
配基密度(umol/ml) | 7 |
結合載量(mg/ml) | >18mg BSA/ml |
pH穩定性 | 3~13(長期);4~12(短期,在位清洗[CIP]) |
化學穩定性 | 在以下溶液中穩定:6M鹽酸胍;8M尿素;70%乙醇 |
耐熱性 | 121℃,水中20min |
應用 | 白蛋白、干擾素、凝血因子以及各種需要NAD+和NADP+的酶的分離 |
使用方法
3.1裝柱
裝柱按照標準操作規程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。
3.2平衡
用2~5個柱床體積的初始緩沖溶液進行平衡,直至pH和電導率保持不變。平衡緩沖液一般是根據需要純化的蛋白來決定用哪種緩沖液。
3.3上樣
(1)不同物質和介質會有強弱不同的結合能力,主要取決于流速、pH、緩沖溶液組成和溫度。
(2)樣品pH 應該和平衡緩沖液pH相同,上樣前樣品應該用0.22um或者0.45um的濾膜過濾,可以延長凝膠的使用壽命。
(3)上樣完后用緩沖液平衡,直至流出液電導和pH不變。
3.4洗脫
(1)洗脫液根據需要純化的樣品決定。可以采用改變緩沖液pH、極性或者離子強度。
(2)特異性吸附蛋白可以采用低濃度競爭洗脫、梯度或者線性洗脫。
3.5 再生
對于使用過的凝膠,先用2~3倍柱床體積的0.1mol/L Tris·HCl+0.5mol/L NaCl(pH8.5)和0.1mol/L NaAc+0.5mol/L NaCl(pH4.5)依次反復沖洗3~4次,然后用平衡緩沖溶液平衡。在一些應用中,變性蛋白或者一些脂類物質在再生步驟不會被洗脫掉,可以采用在位清洗(CIP)去除。
3.6在位清洗
層析純化過程中產生的沉淀或變性蛋白可用如下方法進行在位清洗:
(1)先用4倍柱床體積0.1M NaOH,流速40cm/h清洗;
(2)然后用3~4倍柱床體積2M硫氰酸鉀溶液清洗柱子;
(3)最后立即用至少5倍柱床體積的緩沖液平衡柱子(pH8.0)。
3.7存儲
保存在2~8℃,20%乙醇溶液中(pH8.0,含0.1M磷酸二氫鉀),干燥、通風、清潔處。避免與氧化劑接觸,不可冷凍。
3.8運輸
運輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴禁與有毒、有害物品混運。
注意事項
(1)樣品必須澄清沒有顆粒。
(2)樣品與層析介質必須用洗脫緩沖液徹底平衡后,才能進行柱層析。
(3)所裝的柱床必須表面平整,無溝流及氣泡,否則應重裝。
(4)洗脫過程中應嚴格控制流速,且勿過快。
(5)加樣及整個洗脫過程中,嚴防柱面變干。
(6)本品應避免與氧化劑接觸,避免長時間暴露在空氣中。
產品牌號 | 貨號 | 包裝規格 |
Blue Seplife FF | A4193202 | 25ml |
A4193203 | 100ml | |
A4193204 | 500ml | |
A4193205 | 1L | |
A4193206 | 5L | |
A4193207 | 10L |
生產日期:見標簽
使用期限:在適當的貯藏條件下可貯藏5年
注冊人名稱/生產企業:西安藍曉科技新材料股份有限公司
注冊人住址/生產地址:西安市高新開發區錦業路135號藍曉科技園
售后服務單位:西安藍曉科技新材料股份有限公司
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官方網站:www.sunresin.com
注冊人名稱/銷售企業:蘇州藍曉生物科技有限公司
注冊人地址/銷售地址:蘇州市區工業園區裕新路108號5樓525室
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