Seplife? RP LXMS-30(300)是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一款中高壓色譜填料，是以聚苯乙烯/二乙烯基苯為基質(zhì)的多孔高聚物，其具有比表面積大、優(yōu)良的化學(xué)、物理穩(wěn)定性等特點(diǎn)。與傳統(tǒng)反相硅膠填料不耐酸堿，pH操作范圍窄相比，Seplife? RP LXMS-30(100)擁有高流速、高動(dòng)態(tài)載量的優(yōu)點(diǎn)， 非常適合快速高效層析的應(yīng)用，在提高用戶(hù)生產(chǎn)效率的同時(shí)，進(jìn)一步降低了用戶(hù)的生產(chǎn)成本。廣泛應(yīng)用于小分子化合物、多肽、低分子量的蛋白和其他生物分子進(jìn)行反相色譜（reversed phase chromatography RPC）分離。

使用方法

勻漿濃度等于靜置膠體積除以除以勻漿后的總體積。采用0.5M NaCl勻漿可獲得最佳裝柱效果，其濃度為60%-70%。方法如下：

1)色譜柱的柱體積 V，V=Ac×L，Ac=π×r2。

Ac：色譜柱橫截面積；L:色譜柱高度；r：色譜柱半徑。

2) 攪動(dòng)介質(zhì)形成勻漿液，量取所需質(zhì)量或體積。其為柱體積的1.2倍左右，防止收縮。

3）用 0.5 M NaCl 溶液置換20%乙醇，平衡過(guò)夜。

4）裝柱之前，用 0.5 M NaCl 溶液調(diào)整勻漿濃度為 65 ~ 70%；將勻漿一次性倒入層析柱，沉降平衡后標(biāo)注高度。

5）將分配器裝入，調(diào)節(jié)高度使得壓縮系數(shù)為 1.05 ~ 1.10；然后啟動(dòng)輸液泵，用 1.5~2 倍工作流速使柱床穩(wěn)定。

6）按照 SOP 進(jìn)行柱效和對(duì)稱(chēng)性的測(cè)定，須達(dá)到預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)。 

3.2 柱效評(píng)價(jià) 

裝好之后，色譜柱用3-5CV超純水清洗。流速控制1-5cm/min平衡并進(jìn)行柱效測(cè)試。

離子交換層析柱的柱效測(cè)試方法

樣品：      2 M NaCl 溶液 

上樣量：    1~5 % 柱體積 

洗脫液：    0.5 M NaCl 溶液 

線性流速：  100 cm/h 

檢測(cè)：      UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上樣：電導(dǎo)檢測(cè)儀

3.3 清洗 

裝好的色譜柱應(yīng)使用至少使用5CV的去離子水清洗。 

3.4平衡

裝柱后先用流動(dòng)相平衡3-4CV，流速控制1-5cm/min，直到流穿的電導(dǎo)和pH保持不變方可進(jìn)行上樣。

3.5上樣 

固體樣品可用平衡液溶解配制；低濃度樣品溶液盡量提前濃縮；高濃度樣品溶液可用平衡液稀釋。同時(shí)為了避免堵塞層析柱，樣品需要（離心或膜過(guò)濾）澄清處理。上樣量根據(jù)介質(zhì)的載量和樣品中目標(biāo)蛋白的濃度估算，上樣前請(qǐng)確保目標(biāo)物緩沖液應(yīng)盡可能與平衡液一致。首次試驗(yàn)可減小上樣量，之后可根據(jù)目標(biāo)物保留時(shí)間和峰型增加上樣量。

3.6 洗脫 

采用2-10CV的甲醇、乙醇、乙腈、丙酮等的（含水）溶液溶出，用酸、堿、緩沖液等調(diào)節(jié)PH值或兩者并用使有效成分洗脫。

3.7再生清洗（CIP） 

先使用乙醇、丙酮、堿+乙醇等溶劑按操作流速?zèng)_洗3-4CV，然后用流動(dòng)相平衡清洗3-4CV。

3.8 應(yīng)用案例

Seplife? RP LXMS-30 具高流速、高動(dòng)態(tài)載量的特點(diǎn)，非常適合快速高效層析的應(yīng)用。同時(shí)，優(yōu)異的分辨率使其在精細(xì)純化階段具有比傳統(tǒng)離子交換層析介質(zhì)更好的雜質(zhì)去除能力。使用小分子茶堿驗(yàn)證層析柱分辨率，圖1分別顯示了Seplife? RP LXMS-30 (A)與國(guó)際之名填料(B)同樣具有優(yōu)異的分辨率；圖2和圖3分別顯示了Seplife? RP LXMS-30 (A)與國(guó)際之名填料(B)在分離標(biāo)準(zhǔn)蛋白的分離效果圖譜。

圖1  A:Seplife? RP LXMS-30(300) 分離茶堿圖譜     B:國(guó)際某知名填料分離茶堿圖譜

圖2 Seplife? RP LXMS-30(300) 分離標(biāo)準(zhǔn)蛋白圖譜

圖3 國(guó)際某知名填料分離標(biāo)準(zhǔn)蛋白圖譜

4.存儲(chǔ)

暫時(shí)不使用的層析介質(zhì)需保存在 4～30 ℃ 的 20-25%乙醇中。 

5.運(yùn)輸

運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。

生產(chǎn)日期：見(jiàn)標(biāo)簽

使用期限：在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年

注冊(cè)人名稱(chēng)/生產(chǎn)企業(yè)：西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司

注冊(cè)人住址/生產(chǎn)地址：西安市高新開(kāi)發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園

售后服務(wù)單位：西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司

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